ELISA SAMPLE

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  • 如果样本不是血清、血浆,能否用ELISA来检测?
  • 可以。但是,由于样品特性会影响您的ELISA结果,您需要考虑样品“基质”的影响。基质是靶标分析物所在的液体环境,其组分可影响ELISA的结果。特别是,含有低蛋白质浓度的样品类型通常具有最大的影响。低蛋白质样品(如脑脊液(CSF)、组织培养上清液、支气管肺泡灌洗(BAL)液和尿液)中分析物的定量结果,可能无法与我们的标准曲线得出的结果作比较。这是因为我们的标准曲线通常用基于血清的稀释液作为基质(标准稀释液)来制备。 

    应将蛋白质浓度较低的样品基质修饰至更类似于标准稀释液。我们的研究人员发现,向低蛋白质样品中加入一种蛋白质成分,如牛血清白蛋白(BSA),并不足以完全复制标准稀释液。我们发现,血清是特别关键的成分。

    对于CSF和类似的低蛋白样品类型,我们调整样品基质,使其更类似于标准稀释液。为此,我们将样品以1:4稀释(一份样品加三份标准稀释液,试剂盒中有提供)。该稀释液是合适的含血清的蛋白质基质。您也可以使用从正常供体中合并的血清代替标准稀释液。如果使用合并血清,您需要知道其中已含有的分析物的量。这样可以将适当的校正因子应用于你的检测结果。

    有时您需要复制样品类型的组分,用作阴性对照或用作制备ELISA样品的稀释液。来自正常供体的合并血清或血浆,或含/不含添加血清的非条件培养基,非常易于获得。当样品是CSF时,您可能需要使用人工CSF,其组分如下:129 mM NaCl,3 mM KCl,1.25 mM NaHPO4,1.8 mM MgSO4,1.6 mM CaCl2,21 mM NaHCO3以及10 mM 葡萄糖,pH 7.4(Paris D等人(2002) Prostaglandins Other Lipid Mediat 70(1-2):1-12 [PMID: 12428674])。

    我们建议使用ELISA试剂盒中提供的缓冲液和特定稀释液。所有这些都经过优化,可用于这些试剂盒。如果使用任何其他缓冲液或组分,我们无法保证我们试剂盒的性能与宣传中所说的一样好。此外,当您使用一种试剂盒时,请不要使用另一种试剂盒中的试剂。我们提供的许多试剂都因试剂盒甚至是批次而有所差别。如果您需要更多帮助,请联系技术支持tech@laizee.com